miRNA是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约19~25个核苷酸单链小分子RNA，经典的功能包括：

（1）翻译抑制：miRNA与靶mRNA通过6-7个碱基互补结合，可导致miRNA在蛋白质翻译水平上抑制靶基因表达。

（2）mRNA的降解：miRNA也有可能影响mRNA的稳定性。如果miRNA与靶位点完全互补（或者几乎完全互补），那么这些miRNA的结合往往会引起靶mRNA的降解。每个miRNA可以有多个靶基因，而几个miRNAs也可以调节同一个基因。

举例:PAK2和hsa-miR-455-3p    

NCBI-gene-mirbase库-找到成熟体-get sequence---找到seed区、7mer-A1、7mer-M8、8mer

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/

把对应的成熟体序列的seed区、7mer-A1、7mer-M8、8mer，找到

确认目的基因的3’UTR区（若有多个转录本且3’UTRz不一致，要确认使用哪一个转录本）

选择转录本把对应的3’UTR区复制到word

预测miRNA和编码基因是否结合

http://www.targetscan.org/vert_80/

出现一个保守结合位点和非保守结合位点（建议两个都要做全碱基突变）

结合位点的分值评估解读：

1.Predicted consequential pairing of target region (top) and miRNA (bottom)：白色部分表示靶向区域与miRNA的结合位点；

2.Context++ score：绝对值越大，置信度越高；

3.Context++ score percentile：数值越靠近100，置信度越高；

4.Weighted context++ score：各转录本3’UTR加权分值，数值越小，置信度越高；

5.Conserved branch length：每个结合位点在物种之间的系统发育分支长度的总和，与位点类型有关； 

6.PCT：物种间进化评分值，数值越接近1，保守性越广。