ELISA
服务介绍
ELISA(酶联免疫吸附试验):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。ELISA还可轻松改造为更高通量筛选方法,帮助研究人员通过单次运行检测大量样品。
技术原理
抗原-抗体特异性结合
ELISA依赖抗原与抗体的高特异性结合,通过固相载体(如96孔板)预先包被已知抗体或抗原,捕获样本中的目标分子。
酶标记与信号放大
结合到固相载体上的目标分子通过酶标记的二抗或抗原(如辣根过氧化物酶HRP)进行识别,加入底物(如TMB)后,酶催化底物产生颜色变化,颜色深浅与目标分子浓度成正比。
检测方法分类
双抗体夹心法:适用于大分子抗原检测,需两种抗体分别结合抗原的不同表位。
间接法:用于检测抗体,一抗与样本结合后,再用酶标二抗识别一抗。
竞争法:样本抗原与标记抗原竞争结合抗体,信号与样本抗原浓度成反比。
ELISA(酶联免疫吸附试验):是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。ELISA还可轻松改造为更高通量筛选方法,帮助研究人员通过单次运行检测大量样品。
技术原理
抗原-抗体特异性结合
ELISA依赖抗原与抗体的高特异性结合,通过固相载体(如96孔板)预先包被已知抗体或抗原,捕获样本中的目标分子。
酶标记与信号放大
结合到固相载体上的目标分子通过酶标记的二抗或抗原(如辣根过氧化物酶HRP)进行识别,加入底物(如TMB)后,酶催化底物产生颜色变化,颜色深浅与目标分子浓度成正比。
检测方法分类
双抗体夹心法:适用于大分子抗原检测,需两种抗体分别结合抗原的不同表位。
间接法:用于检测抗体,一抗与样本结合后,再用酶标二抗识别一抗。
竞争法:样本抗原与标记抗原竞争结合抗体,信号与样本抗原浓度成反比。
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