肿瘤类器官慢病毒稳转模型构建
类器官(Organoids)正成为一种非常有价值的研究工具,在组织病理学、生物标志物与遗传特征、药理功能水平上保留了大部分组织特征、具有较好的临床相关性(Clinical relevance)和模型创新性。
相对于动物模型(例如,PDX),类器官一个重要优势是可以更加便利的进行基因干预。本文介绍了基于慢病毒载体的基因修饰工具,包括在类器官中过表达特定基因,表达特定标签蛋白、基因沉默和基因编辑等。
利用慢病毒(Lentivirus)载体实现外源基因递送,对二维条件下培养的大多数哺乳动物细胞有效。相比之下,在类器官的培养条件下,细胞外基质水凝胶对外源病毒感染细胞造成干扰,类器官的干细胞特性,也不利于外源基因的表达。
慢病毒稳转类器官优势:
1、高级别概念验证数据:类器官模型更好的模拟人体生理和病理的疾病模型,在类器官模型中开展基因干预,概念验证更具说服力;
2、类器官模型丰富:相对细胞系,货架式类器官模型库资源更加丰富,可以提供数量更多的模型可供基因修饰;
3、基因操作便利:可以在4-8周内完成稳定表达株的建立和鉴定,得到可传代且稳定表达的类器官模型群(Stable pool);
4、表型研究方法丰富:构建的类器官模型,可以开展增殖能力检测、药物敏感性测试、凋亡分析、细胞周期分析、体内动物实验(PDOX,类器官抑制瘤动物模型)和肿瘤免疫等功能试验和表型研究;
5、兼容多组学研究:经过基因修饰的类器官模型,可以利用基因组、转录组、蛋白组、表观遗传等多种组学工具开展机制研究。
相对于动物模型(例如,PDX),类器官一个重要优势是可以更加便利的进行基因干预。本文介绍了基于慢病毒载体的基因修饰工具,包括在类器官中过表达特定基因,表达特定标签蛋白、基因沉默和基因编辑等。
利用慢病毒(Lentivirus)载体实现外源基因递送,对二维条件下培养的大多数哺乳动物细胞有效。相比之下,在类器官的培养条件下,细胞外基质水凝胶对外源病毒感染细胞造成干扰,类器官的干细胞特性,也不利于外源基因的表达。
慢病毒稳转类器官优势:
1、高级别概念验证数据:类器官模型更好的模拟人体生理和病理的疾病模型,在类器官模型中开展基因干预,概念验证更具说服力;
2、类器官模型丰富:相对细胞系,货架式类器官模型库资源更加丰富,可以提供数量更多的模型可供基因修饰;
3、基因操作便利:可以在4-8周内完成稳定表达株的建立和鉴定,得到可传代且稳定表达的类器官模型群(Stable pool);
4、表型研究方法丰富:构建的类器官模型,可以开展增殖能力检测、药物敏感性测试、凋亡分析、细胞周期分析、体内动物实验(PDOX,类器官抑制瘤动物模型)和肿瘤免疫等功能试验和表型研究;
5、兼容多组学研究:经过基因修饰的类器官模型,可以利用基因组、转录组、蛋白组、表观遗传等多种组学工具开展机制研究。
类器官血管生成试剂盒