实战分析：肿瘤免疫治疗中的铁死亡

2024年4月10日，武汉大学医学研究院、免疫与代谢前沿科学中心、中南医院以及泰康生命医学中心张金方课题组在PNAS杂志在线发表了题为USP8-governed GPX4 homeostasis orchestrates ferroptosis and cancer immunotherapy的研究论文。

1. 抑制USP8增加肿瘤细胞对铁死亡的敏感性，过表达USP8可以抑制铁死亡。
2. USP8抑制剂联合铁死亡诱导剂抑制肿瘤增殖
3. USP8抑制剂联合铁死亡诱导剂改善PD-1/PD-L1阻断抗体的治疗效果。

1. 敲低USP8 WB和qPCR检测铁死亡相关靶点GPX4的蛋白表达与RNA表达。
2. 铁死亡抑制可抑制GPX4的蛋白表达。
3. 放线菌酮(CHX)实验敲低USP8缩短GPX4蛋白的半衰期。

1. Co-IP实验和GST pulldown验证USP8与GPX4互作。
2. 构建USP8不同的突变体 Co-IP实验检测USP8与GPX4蛋白结合的具体位置。
3. Co-IP分析USP8如何影响GPX4蛋白的稳定性。
4. 构建不同的泛素化位点突变体进行Co-IP分析， USP8去除GPX4蛋白泛素化的具体位点。
   
       图2 USP8影响GPX4蛋白的稳定性

1. USP8的特异性敲除导致小鼠寿命缩短，肠上皮细胞死亡增加。
2. USP8杂合缺失小鼠可抑制结直肠肿瘤发生发展。